Ecole Supérieure des Techniques de Biologie Appliquée

hôpital de la Pitié-Salpêtrière – Assistant-Ingénieur en Biochimie des Protéines (F/H)

Assistant-Ingénieur en Biochimie des Protéines (F/H)
Lieu : Institut du Cerveau et de la Moelle épinière, Pitié-Salpêtrière, Paris
Structure de rattachement : Equipe Maladie d’Alzheimer et maladies à Prions, U1127

Type de contrat : CDD de 18 mois
Temps de travail : Temps plein
Date de début : Avril 2018

Missions :

Le laboratoire d’accueil étudie le mauvais repliement de protéines intervenant dans différentes maladies neurodégénératives incluant la maladie d’Alzheimer, la maladie de Parkinson, les maladies à prions.

Dans le cadre d’une collaboration une firme pharmaceutique, nous étudions l’amplification in vitro de ces protéines mal repliées ayant la propriété de former des structures fibrillaires (alpha-synucléine, protéine tau, peptide a-beta et protéine prion). Un des objectifs est de développer une méthode de diagnostic ante-mortem spécifique et sensible à partir de tissus et de liquides biologiques d’origine humaine.

Plus spécifiquement, le projet s’appuie sur la technologie RT-QuIC (Quacking-induced conversion), initialement développée dans le domaine des prions. Cette méthode utilise la capacité des assemblages pathologiques à agréger la protéine recombinante et l’affinité des structures amyloïdes néoformées pour un marqueur fluorescent permettant de suivre en temps réel la formation de structures amyloïdes.

Tâches principales :

1) Production des protéines recombinantes servant de substrat pour les tests d’amplification in vitro :

-Clonage des plasmides dans des bactéries compétentes (E.Coli),
-Production de protéines en suivant les étapes du protocole (utilisation des chromatographies d’affinité, échangeuse d’ions, d’exclusion de taille),
-Utilisation de HPLC, FPLC,
-Vérification de la pureté par SDS PAGE, western-blot,
-Lyophilisation des protéines.

2) Utilisation des protéines recombinantes pour effectuer les tests d’amplification in vitro :

-Utilisation de la méthode RT-QuIC en routine,
-Analyse des résultats,
-Participation au développement des outils diagnostiques,
-Préparation et entretien du matériel nécessaire,
-Tenir un cahier de laboratoire.

CANDIDAT

Profil recherché :

Diplômé d’un niveau BTS minimum, justifiant d’une expérience en biochimie ou/et biologie moléculaire

-Connaître les techniques de base en biologie moléculaire
-Avoir des notions de base en biochimie des protéines
-Connaître les logiciels bureautiques courants (Excel/Word…)
-Une expérience dans les laboratoires de confinement de niveau 3 serait la bienvenue
-Une expérience de l’utilisation de l’HPLC ou FPLC serait un avantage
-Rigueur, autonomie et esprit d’équipe sont également des qualités recherchées

Lieu du travail :

L’activité sera exercée alternativement en laboratoire de recherche de niveau 1 (L1), niveau 2 (L2) et niveau 3 (L3), sur deux sites dans l’hôpital de la Pitié-Salpêtrière : ICM (L1) et Laboratoire de Neuropathologie Raymond Escourolle (L1, L2, L3) .

 

Contact: pour obtenir des précisions sur cette offre et les coordonnées de la personne en charge de cette offre, envoyez un email à cathy.guilbot@estba.org , en précisant vos nom et prénom ainsi que le nom et l’année de la formation que vous avez suivie à l’ESTBA.